电子内窥镜图像和病理组织图像的一对一对应法

随着内窥镜的不断进步，对内窥镜图像与组织图像的关联也进行了大量的研究。但是，在内窥镜图像和病理租织图像的对比中，用系统的方法进行对比的例子很少。我们将内窥镜图像和病理组织图像的一对一对应法作为KOTO method进行了报告，在本稿中解说了其详细情况，对比的方法由以下3段组成。1)切出检体时在水浸下拍摄整体照片以及利用体视显微镜的放大照片，2)通过重合组织像和整体像进行病变部位的位置对准，在此基础上，将体视显微镜照片和组织像重合，用腺管单元进行对应。3)进一步使体视显微镜照片和内窥镜照片相对应，可以进行组织像和内窥镜照片的对比。希望这种有条不紊的详细对比将有助于内窥镜诊断的进一步提高。

I首先，

Ⅱ对比方法

随着图像增强内窥镜和放大内窥镜等内窥镜的进行，内窥镜诊断得到了飞快的提高。显示了VS classification和JNET分类2等的内窥镜部分，对内窥镜图像和组织像的连接也进行了很多研究。但是，进行内窥镜图像和病理组织像所采用的一对一的对比的例子很少。内窥镜像和组织像的一对一对应在进行高精度的内窥镜诊断上是很重要的，我们提出并报告了内窥镜像和病理组织像的系统的一对一对应法作为KOTO method 3。这次，就该方法的详细情况提出具体例子，并进行解说。

II 对比方法

具体的对比方法分为以下3个阶段进行解说。

1) 福尔马林固定后检体的切出及摄影.

2) 立体显微镜照片和组织像的对比.

3) 按照内窥镜照片和体视显微镜照片、组织像的对比的顺序进行说明。

1)福尔马林固定后检体的切割及照片摄影

1.内窥镜切除检体固定和摄影

使用10%中性福尔马林，贴在软木板等漂浮的板上，在粘膜面向下的状态下固定。固定后整个样本的照片在水浸数码相机(D7500.Nikon.通过Tokyo，Japan)进行摄影(Figure1)。由于水浸会使检体表面的反射光消失，所以具有容易观察表面结构等的优点，如果是比较小的检体，在体视显微镜下拍摄“整体图像的话，与大照片的对应就会很小。

Figure2的照片是实体显微镜(SZX16.OLYMPUS.Tokyo.这是使用Japan)和显微镜用照相机(DP20.OLYMPUS)拍摄的整体图像。

2、切割与染色

在标本上间隔2-3毫米的距离，此时只对粘膜进行割开，注意不对粘膜下层进行切开（图3）如果将标本完全切开的话，各切片会产生偏差，因此表面会出现不好看的结构，相反，如果分割过浅的话，在分离时也有不能切断相同部位的情况，有必要充分切入粘膜深层。再次在水中浸泡粘膜状态的标本，拍摄整体照片以及病变中心区域的体视显微镜照片(Figure4).

在稀释到0.5%左右的龙胆紫中浸泡数秒，立即水洗。通过龙胆紫染色，由于表面结构变得清晰，所以体视显微镜像和内镜像的对应以及体视显微镜像和图像强调内窥镜像变得容易对应。龙胆紫染色后的标本：在水下拍摄整体照片，拍摄放大我们需要区域的体视显微镜照片(Figure5)。

我们在放大照片的拍摄中使用了体视显微镜，但是也可以用分辨率高的数码相机等进行拍摄来代替。3.进行标本的切割和标本作照片拍摄后，将标本的粘膜下屋进行切割，制作标本.将切出的标本从斜向立体显微镜通过拍摄照片，也可以大体观察从表面察觉到的血管深度(Figure6-a，b)。

标本制作时，尽量形成笔直的形状(与摄影时相同的形状)。标本处理需要注意。在制作病理标本时，由于包埋时的类型决定了大小，所以长度超过的标本在弯曲的状态下需要进行标本制作。但是，在弯曲的标本中，由于下述行程2)以下的对应变得困难，所以需要进行适当的切割，努力制作笔直的书(切割时推荐用切割部位的切割的状熊拍摄上述照片)。

2) 实体显微镜照片和组织像的对比

这次，实体显微镜照片和组织像的重叠，用Windows10的电脑进行图像处理软件(Adobe Photoshop Elements15.Adobe Systems San Jose。组织照片为L(APERIO AT2.LeicaBiosystems，Nussloch.German)。在JPEGSL作为TIF文件保存L后，将一页像和各部位的放大像保存((Aperio ImageScope.12.0.1.5027，Leica Biosystems，用于以下的对比。

1. 标本整体像和组织像的重合

首先，将标本的整体像和标本的组织像的照片重合，进行整体的位置对准(Figure7)。

使用Photoshop按照下述1~5的顺序进行重合。①、在Photoshop中打开检体的整体照片和组织标本的标签像，在工科SPA一托一处使用左侧的一圈自动选择一勒，选择标本的背景(此时，将容许值设定为与标本很好地从背景区别开来的情况。在这次的病例中，容许值为20)。

②点击上菜单的选择范围内的“选择范围项”，将标本方定为选择范围。③选择菜单放在一块。④其次，切换为整体照片编辑，贴上组织的图像。⑤在选择像，将方形的弹跳框放在大、小组织像，标本整体像的长度是扩大、缩小，标本的整体像的长度是四方的为了是组织像与之相配，旋转使组织像与方向一致，将空隙移到UNING POCKS的外侧，成为指示灯指向的方向的箭头）和拖动使之旋转的1个作品，因此切割标本（比切片时切入数百um-1mm程度的部位成为实际标本将所有的长度、标记部分和样品的宽度结合起来，推测实际的标本制作部位

2、关注领域的平衡

接着，1）1.采用与①-⑤相同的方法将病变区域放大后的实体照片与组织的合称《Figure 8-a，b.）一边考虑整体的位置，一边将标记和标本表面的合称，寻找凹凸不平、腺管开口的部位。如果实体显微镜以及组织都可插入，则将尺寸大致对齐后再重合，或者寻找部位相交处会变得比较容易。但是，在本作过程中，也有脱水和石蜡切片伸展等过程，检查由于标本的比例尺寸不一定与切出时一致，所以根据需要用特殊的粘膜凹凸等进行对应并进行修正。通过将色素染色前和染色后的照片重合，也可以同时得到表面结构和血管的情况(Figure9)。在摄影的照片上摆放组织像。血管深度的一部分也变得容易(Figure10)。

3)内窥镜照片和体显微镜照片、组织像的对比

1.与内窥镜照片的对比标志的位置和特殊的表面微结构、血管等相对应.。将立体显微镜照片(Figure11-a，b)和内窥镜照片(Figure11-c，d)进行比较。实体显微镜照片推定的实际的标本对应部位的内窥镜照片上粗照片左重对齐，使之对应(Figure11-b，d.内视镜是与显微镜头类似的图像，特别是在边缘部会产生变形，因此，从使其成对的实体显微镜照片中的腺管的位置费系，进行了实际的标本作品。使制面和病变的范围等相对应。内窥镜照片是否可以在接近正面观察的状态下拍摄，另外，根据是否有特征性的构造物，对比所需的劳力会发生很大的变化。在1)~3)中以组织为媒介的对比方法，如果在切割时进行浸水下的照片拍摄的话，只用通常的病理诊断业务中使用的HE标本就可以进行对比。但是，关于标本的切割复原图部分，不得不从组织的形态来推测。因为没有得到。这一点改良了，KOTO methodⅡ的对比方法！由岸本等人提出。

Ⅲ结语：

以内窥镜图像和病理组像的系统的一对一对法为媒介，通过详细的对比，将组织像的内窥镜图像转移到内窥镜图像上，以组织学的根据为基础的内窥镜诊断有望得到进一步的发展。